高通量测序

免疫组库检测

高深度TCR/BCR测序,全景展示个体免疫多样性与克隆动态,为肿瘤免疫、自免与疫苗研究提供定量免疫图谱。相关服务仅供科研用途。

服务概述

T细胞和B细胞属于人体免疫细胞,在肿瘤免疫治疗、自身免疫性疾病以及移植耐受等方面发挥重要作用。每个T/B细胞都有自己独特的T细胞受体(TCR)或B细胞受体(BCR),如同细胞的“身份证”。

在适应性免疫中,T细胞可特异识别病原体携带的抗原,结合后迅速增殖,以精准、快速地杀灭病原体,这一过程称为细胞免疫;T细胞也能指导B细胞产生抗体,抗体与病原体表面的特异抗原结合后,引导其他免疫细胞清除病原体,这一过程称为体液免疫。两类免疫方式协同配合,共同保卫人体健康。

本服务包含两条产品线:①二代产品线——多重PCR或5'RACE扩增V(D)J区域,结合Illumina高深度测序,适用于高深度定量与低频克隆检测;②三代全长产品线——滚环扩增结合Nanopore测序,获取V-(D)-J全长与重链-轻链配对信息,适用于全长与配对分析。可按研究目标选择相应产品线。相关服务仅供科研用途。

V(D)J重排生成免疫多样性

适应性免疫系统如何做到这一点?

与人体基因组中其他基因不同,TCR和BCR的基因序列会随着细胞分化成熟而重新排列,从而产生上亿种不同的基因序列组合。由此形成的遗传多样性,使人类免疫系统能够监控并应对多种致病抗原。读取参与适应性免疫反应的T细胞、B细胞遗传密码,可用于开发新的药物和技术,并准确监测免疫系统对疾病和治疗的反应,帮助科研者理解疾病与免疫系统的相互作用。

技术优势

覆盖全样本的免疫组库

长期专注于临床科研领域,可将PBMC、全血、骨髓、血浆、石蜡切片(FFPE)、肿瘤组织等临床常见样品提取核酸后进行免疫组库测序。

高深度测序

支持低频克隆检测,测序深度与灵敏度以项目方案 / 验证数据为准。【测序深度与 LoD 数值待客户以验证数据确认】

全链型覆盖

支持TCRα/β/γ/δ及BCR的IgH/IgK/IgL各链测序,一次建库获取全谱系免疫图谱;还支持HLA基因分型,通过识别TCR序列与特定HLA等位基因的关联,推断TCR克隆可能针对的抗原。

全长免疫组库测序

三代全长产品线:采用独特的滚环扩增,扩增TCR和BCR的V-(D)-J序列全长(包括FR1-4和CDR1-3)。同一条TCR/BCR序列重复扩增后进行纳米孔测序,可大幅降低测序错误率,适用于全长序列与重链-轻链配对分析。

专有分析流程

自主生物信息学分析算法可进行V(D)J注释及克隆型定义,低错误率,结果可追溯、可复现,符合发表标准。可做标准分析和深度分析,也可联合其他组学进行整合分析。

应用场景

肿瘤免疫监测

纵向追踪治疗前后TIL克隆动态,评估免疫检查点抑制剂疗效。

感染免疫追踪

解析病毒感染(如COVID-19、EBV)引发的T/B细胞免疫应答规律。

自身免疫分型

识别异常扩增克隆,辅助RA、SLE、MS等自免疾病的精准分型。

疫苗应答评估

定量疫苗诱导的抗原特异性B细胞克隆扩增,评估体液免疫应答强度。

服务流程

01

样本接收

血液、组织或PBMC样本验收,核实质量。

02

核酸提取

高质量gDNA/RNA提取并质检:DNA 关注浓度与完整性,RNA 补充 RIN 与 260/230(260/280 仅反映蛋白污染,不代表完整性与得率);各方法核酸类型与起始量以项目方案为准。

03

文库构建

(二代产品线)多重PCR或5'RACE扩增V(D)J区域,加接UMI与index,UMI 校正PCR扩增偏倚与重复。

04

深度测序

Illumina双端150bp(PE150)测序,测序深度按项目设定以覆盖低频克隆。【深度数值待客户确认】

05

生信分析

专有流程完成V(D)J注释、克隆型定义、多样性指数及V基因使用频率统计。

06

结题报告

交付克隆型列表、多样性分析图表及原始数据,格式支持后续统计分析;交付周期以项目方案确认(工作日)。【周期天数待客户确认】

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