基因编辑

敲除细胞株构建

CRISPR-Cas9介导的基因功能性敲除,提供多克隆验证报告。

服务概述

基因敲除通过 CRISPR/Cas9 在目标基因编码区诱导双链断裂,经非同源末端连接(NHEJ)修复形成插入缺失(indel)。由于 indel 可能为框内、并可能出现外显子跳跃、替代起始或残余蛋白表达,需筛选具有预期编辑结局的克隆并结合多维验证评价失活程度。

河维欧提供从 sgRNA 设计、编辑、单克隆分选到基因型、蛋白及必要功能验证的全流程服务,交付经系统验证的功能缺失细胞模型。

技术优势

编辑结局导向

靶向关键外显子并筛选具预期编辑结局的克隆,结合 Sanger/NGS、蛋白表达及必要功能实验评价失活状态。

多克隆交付

提供多个独立克隆,降低克隆特异性偏差风险,增强结论稳健性。

广泛细胞兼容

适配肿瘤细胞株、原代细胞、干细胞等多种细胞类型。

应用场景

基因功能研究

通过功能缺失表型解析基因作用。

疾病模型构建

建立肿瘤抑制基因等失活的疾病相关模型。

靶点验证

敲除候选靶点验证其成药性与依赖性。

通路机制解析

阻断通路节点研究其下游效应。

服务流程

01

需求沟通

明确目标基因、细胞类型与编辑目标

02

编辑设计

sgRNA 及供体 / 碱基编辑 / 先导编辑组分设计

03

编辑递送

编辑元件导入目标细胞

04

单克隆化

单克隆分选与扩增培养

05

鉴定验证

基因型(含 junction / 长读长 / 拷贝数按需)、蛋白及必要功能验证

06

细胞交付

交付细胞资源与验证报告

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