服务概述
基因敲除通过 CRISPR/Cas9 在目标基因编码区诱导双链断裂,经非同源末端连接(NHEJ)修复形成插入缺失(indel)。由于 indel 可能为框内、并可能出现外显子跳跃、替代起始或残余蛋白表达,需筛选具有预期编辑结局的克隆并结合多维验证评价失活程度。
河维欧提供从 sgRNA 设计、编辑、单克隆分选到基因型、蛋白及必要功能验证的全流程服务,交付经系统验证的功能缺失细胞模型。
技术优势
编辑结局导向
靶向关键外显子并筛选具预期编辑结局的克隆,结合 Sanger/NGS、蛋白表达及必要功能实验评价失活状态。
多克隆交付
提供多个独立克隆,降低克隆特异性偏差风险,增强结论稳健性。
广泛细胞兼容
适配肿瘤细胞株、原代细胞、干细胞等多种细胞类型。
应用场景
基因功能研究
通过功能缺失表型解析基因作用。
疾病模型构建
建立肿瘤抑制基因等失活的疾病相关模型。
靶点验证
敲除候选靶点验证其成药性与依赖性。
通路机制解析
阻断通路节点研究其下游效应。
服务流程
01
需求沟通
明确目标基因、细胞类型与编辑目标
02
编辑设计
sgRNA 及供体 / 碱基编辑 / 先导编辑组分设计
03
编辑递送
编辑元件导入目标细胞
04
单克隆化
单克隆分选与扩增培养
05
鉴定验证
基因型(含 junction / 长读长 / 拷贝数按需)、蛋白及必要功能验证
06
细胞交付
交付细胞资源与验证报告
