服务概述
基因敲入借助 CRISPR/Cas9 定点切割与同源重组修复(HDR)等整合策略,将外源序列——如荧光标签、报告基因或表达框——定点整合至基因组指定位点。
河维欧提供供体设计、编辑、单克隆筛选与整合验证的全流程服务:对于标签 / 报告基因 / 表达框等序列整合,优先采用 HDR 或其他整合策略;对于点突变及小型插入 / 缺失,可评估碱基编辑或先导编辑的适配性(BE/PE 不用于大片段整合)。
技术优势
定点整合
以 HDR 等整合策略实现序列定点敲入与内源标记。
策略按目标匹配
序列整合优先 HDR / 整合策略;点突变与小型编辑评估 BE/PE 适配性。
多维整合验证
结合 5′/3′ junction、长扩增子 / 长读长测序、拷贝数及随机整合检测综合确认整合结果;随机整合、供体骨架插入及复杂重排的评价范围、方法学覆盖度与检出限以项目技术方案为准,必要时以全基因组或整合位点分析补充确认。
应用场景
内源标记
敲入荧光蛋白 / 表位标签实现内源蛋白示踪与定位。
报告系统
于内源位点敲入报告基因监测基因表达动态。
人源化模型
敲入人源序列构建人源化细胞模型。
表达框整合
定点整合表达框构建工程化细胞。
服务流程
01
需求沟通
明确目标基因、细胞类型与编辑目标
02
编辑设计
sgRNA 及供体 / 碱基编辑 / 先导编辑组分设计
03
编辑递送
编辑元件导入目标细胞
04
单克隆化
单克隆分选与扩增培养
05
鉴定验证
基因型(含 junction / 长读长 / 拷贝数按需)、蛋白及必要功能验证
06
细胞交付
交付细胞资源与验证报告
