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Cas9-sgRNA文库构建

全基因组或靶向Cas9-sgRNA文库设计与高通量功能筛选。

服务概述

基于 CRISPR/Cas9 的混合(pooled)sgRNA 文库筛选是功能基因组学的核心工具:通过在细胞群中并行敲除数千至全基因组范围的基因,结合正 / 负选择与二代测序读出,高通量鉴定与表型相关的功能基因与必需基因。

河维欧提供从 sgRNA 设计、寡核苷酸合成、文库克隆到扩增质控与(按需)慢病毒包装的全流程服务,支持全基因组及靶向定制文库;文库设计规模、覆盖度与质控指标按项目约定。

技术优势

全流程一体化

覆盖 sgRNA 设计、合成、克隆、扩增与按需包装(慢病毒包装为选配服务,滴度与交付形式以项目方案为准)。

可验证的文库质量

可约定 sgRNA 数、理论覆盖度、克隆数、NGS 覆盖度、丢失 sgRNA 比例与丰度分布均一性等质控指标。

灵活定制

支持全基因组、亚文库及自定义靶基因集(激酶组、表观、膜蛋白等)。

应用场景

必需基因鉴定

负选择筛选鉴定细胞存活与增殖必需基因。

耐药机制研究

正选择筛选发现药物耐受 / 敏感相关基因。

靶点发现

在肿瘤、免疫等模型中挖掘治疗靶点与合成致死关系。

通路解析

系统解析信号通路与调控网络。

服务流程

01

需求沟通

明确文库范围与筛选目标

02

文库设计

sgRNA / crRNA 设计与合成方案

03

克隆构建

寡核苷酸合成与文库克隆

04

扩增质控

文库扩增与均一性、覆盖度质控

05

包装制备

慢病毒包装与滴度测定(按需选配)

06

文库交付

交付文库与质控报告

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