服务概述
Cas12a（旧称 Cpf1）能自主加工 crRNA 阵列并产生粘性末端，多个 crRNA 可串联于单一阵列表达，适合多基因联合敲除与组合筛选；常用 AsCas12a 通常识别 5′-TTTV-3′ PAM，相较常用 SpCas9 的 NGG PAM 可在部分位点提供互补靶向选择，不同 Cas12a 同源酶与工程化变体的靶向范围存在差异。
河维欧提供 Cas12a-crRNA 文库设计与构建服务，支持单基因及成对 / 组合（双敲除）筛选，拓展与 Cas9 互补的靶向空间。
技术优势
多重编辑天然优势
利用 crRNA 阵列自加工能力，在单载体实现多基因同时敲除。
组合筛选能力
支持成对基因双敲除文库，解析基因间上位与协同 / 合成致死关系（文库规模、覆盖度与细胞量需求按基因集与筛选设计评估）。
互补靶向空间
相较常用 SpCas9 的 NGG PAM 偏好，AsCas12a 的 TTTV PAM 可在部分位点提供互补靶向选择；具体可编辑性取决于序列环境、编辑器变体与细胞模型。
应用场景
组合遗传筛选
系统绘制双基因相互作用与合成致死图谱。
旁系同源基因研究
揭示单基因敲除被功能冗余掩盖的表型。
多基因通路解析
同时干扰通路多个节点研究协同效应。
定制功能基因组学
面向特定基因集的高效组合筛选。
服务流程
01
需求沟通
明确文库范围与筛选目标
02
文库设计
sgRNA / crRNA 设计与合成方案
03
克隆构建
寡核苷酸合成与文库克隆
04
扩增质控
文库扩增与均一性、覆盖度质控
05
包装制备
慢病毒包装与滴度测定（按需选配）
06
文库交付
交付文库与质控报告